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在細胞培養中遇到培養液pH值變化太快,怎么辦
    細胞培養是指在體外模擬體內環境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養最看重的就是無菌操作,無菌操作是細胞培養是否成功的關鍵點。凡是放入超凈臺中的不是一次性使用的物品事先都需要經過高壓滅菌;不能進行高壓處理的物品也需要經過75%的乙醇消毒。包括酒精燈、吸管、移液器、試管架、培養皿、廢液缸等。

培養液pH值變化太快,怎么辦?

可能造成的原因:

1.CO2張力不對;

2.培養瓶蓋擰得太緊;

3.NaHCO3 緩沖系統緩沖力不足;

4.培養液中鹽濃度不正確;

5.細菌、酵母或真菌污染。

解決方法:

1.按培養液中NaHCO3濃度增加或減少培養箱內CO2濃度,2.0g/L3.7g/L濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%或者改用不依賴CO2培養液

2.松開瓶蓋1/4

3.HEPES緩沖液至1025mM終濃度

4.CO2培養環境中改用基于Hanks鹽配制的培養液,在大氣培養環境中培養改用Hanks鹽配制的培養液

5.丟棄培養物或用抗生素除菌

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